АЛТ (ALT IFCC)

печать

Audit Diagnostics – европейская надежность и качество химических реактивов для лабораторий различного профиля с 1993 года.

Характеристика набора:

Кат. №. Количество Реагент Хранение
AD732AL 10 x 15 мл
2 x 15 мл		 АЛТ IFCC - 1
АЛТ IFCC - 2		 2-8°C
AD742AL 5 x 50 мл
1 x 50 мл		 АЛТ IFCC - 1
АЛТ IFCC - 2		 2-8°C
AD752AL 5 x 100 мл
1 x 100 мл		 АЛТ IFCC - 1
АЛТ IFCC - 2		 2-8°C

Предназначение:

In Vitro диагностике данный набор реагентов используется для определения аланинаминотрансферазы (АЛТ) в сыворотке и плазме, рекомендованного Международной организацией клинической химии (IFCC) на автоматических и полуавтоматических анализаторах.

Теоретическое обоснование:

Аланинаминотрансфераза катализируют перенос аминогруппы с аминокислот на кетокислоту. Энзим в основном содержится печени, в меньшей концентрации в почках, сердце, скелетных мышцах и селезенке. Измерения активности АЛТ ведется для диагностики печеночных заболеваний. Уровень энзима превышающий в 100 раз норму, может быть сопряжен с некрозом печени.

Пиридоксаль-5-Фосфат является коэнзим аминотрансферазы. Снижение активности аминотрасферазы может быть связана со снижением количества пиридоксаль-5-Фосфат, простетической группы аминотрасферазы.

Международная Федерация Клинической Химии (IFCC) рекомендует методы с добавлением перидоксаль-5-фосфата (добавляется к буферу). Перидоксаль-5-фосфат не входит в набор, поставляется компанией Audit Diagnostics в виде порошка в бутылочках (Кат. № AD806PP (12 x 50 мл) и AD816PP (6 x 66 мл).

Принцип метода:

Метод используется в соответствии с кинетическим определением аланинаминотрансферазы.

Меры предосторожности:

Реагенты можно использовать только профессионально для лабораторной диагностики. Внимательно прочитайте инструкцию по работе с реагентами. Отклонения от порядка выполнения процедуры могут изменить порядок выполнения анализа.

Компоненты цвета и вида:

Реагент 1: Прозрачная бесцветная жидкость.
Реагент 2: Прозрачная, светло-желтая жидкость.

Любые незначительные изменения цвета могут означать, что анализ, возможно, выполнен некорректно. В этом случае обратитесь к программе лабораторного контроля качества. В случае серьезных повреждений флакона и/или крышки, результатом чего стала утечка и/или загрязнение реагента, не используйте комплект и обратитесь к дистрибьютору.

Меры безопасности:

Внимание: Данные реагенты содержат азид натрия, поэтому придерживайтесь всех необходимых мер безопасности при работе с ними в лаборатории. Техническая информация безопасности материалов предоставляется по запросу.

Меры предосторожности:

  • Не используйте просроченные реагенты, дата пригодности указанна на флаконе.
  • Не замораживайте реагенты.
  • Не используйте реагенты для других целей, кроме тех, которые указаны в разделе «ПРЕДНАЗНАЧЕНИЕ».
  • Не меняйте крышки флаконов между собой, это может привести к загрязнению реагентов, что, впоследствии, приведет к неправильным результатам анализа.
  • Следуйте требованиям по утилизации продукта.

Оборудование:

Описание по использованию оборудования предоставляется по запросу.

Состав набора:
Компонент Ингредиенты Концентрация
Реагент 1 TRIS буфер pH 7.3 125.0 ммоль/л
Л-Аланин 625.0 ммоль/л
ЛДГ 1500 Ед/л
Стабилизаторы и антикоагулянты -
Реагент 2 α- Кетоглутарат 94 ммоль/л
NADH 0.23 ммоль/л
Антикоагулянты -

Приготовление реагентов и их стабильность:

Перед использованием аккуратно перемешайте каждый флакон с реагентом.
При правильном хранении набора, неоткрытые реагенты остаются стабильными до окончания даты пригодности, указанной на бирке.
Монореагентная методика: 1 часть Реагента 2 с 5 частями Реагента 1.
При температуре 2-8°C рабочий реагент стабилен 5 недель.
Биреагентная методика: жидкие Реагенты 1 и 2 готовы для использования.
После вскрытия, при правильном хранении, компоненты остаются стабильными до окончания срока годности.

Исследуемый материал (Образец):

Как образец используйте сыворотку или гепаринизированную плазму, свободную от гемолиза. В работе с образцом рекомендуется придерживаться методики работы NCCLS (или похожих условий стандартизации). Образец необходимо набрать в соответствующий контейнер, предназначенный для этого образца. Сыворотка должна быть отделена от клеток сразу же после забора крови.
Сыворотку/плазму необходимо отделить от клеток крови в течение 8 часов после забора.

Стабильность:до 24 часов при температуре 2-8°C

Метод контроля:

Необходимое оборудование (отсутствует в данном комплекте):

Описание Кат. № Описание Кат. №
Калибратор AD983 Фотометр нет
Универсальная контрольная сыворотка. Уровень 1 AD922 Общее лабораторное оборудование нет
Универсальная контрольная сыворотка. Уровень 2 AD932

Процедура определения:

Длина волны: λ= 340 нм (Hg 334-Hg 365)
Температура: 30°C или 37°C
Оптический путь: 1 см

Монореагентная методика Бланк Калибратор Образец
Рабочий реагент 1000 μл 1000 μл 1000 μл
Образец - - 100 µл
Калибратор - 100 µл -
Аккуратно смешать, инкубировать 1 мин. при 30°C или 37°C. В течение следующих 3 минут измеряйте абсорбцию каждую минуту (∆OD/мин).

Расчет по фактору:
340 нм: Ед/л = ∆OD/мин x 1746
334 нм: Ед/л = ∆OD/мин x 1780
365 нм: Ед/л = ∆OD/мин x 3235

Биреагентная методика: Контрольная проба Калибратор Образец
Реагент 1 1000 μл 1000 μл 1000 μл
Образец - - 100 μл
Калибратор - 100 μл -
Аккуратно смешать компоненты, перемешать, инкубировать 2 мин. при 37°C
Реагент 2 200 μл 200 μл 200 μл
Добавить реагент 2 перемешать, инкубировать 1 минуту при 37°C
В течение следующих 4 минут измеряйте изменение абсорбции в минуту (∆OD/мин).

Расчет по фактору: 340 нм: Ед/л = ∆OD/мин x 2063
334 нм: Ед/л = ∆OD/мин x 2103
365 нм: Ед/л = ∆OD/мин x 3823
*Вышеуказанные факторы должны быть указаны в инструкции к калибратору (AD973).

Калибровка:
Используя рекомендуемый калибратор, откалибруйте прибор:

  • Используете новый набор или меняете номер партии реагентов.
  • Производите профилактическое обслуживание или меняете неисправные детали фотометра.
  • Контроли качества за пределами допустимой нормы.

Контроль качества:
Все клинические лаборатории должны установить программу внутреннего контроля качества. Проводить проверку аппаратуры и реагентов при помощи рекомендуемого или схожего контроля. Оценка, полученная для контроля качества, должна соответствовать допустимым пределам производителя или должна быть установлена в соответствии с программой лабораторного контроля качества.

Контроли должны подвергаться анализу:

  • Когда получен предварительный отчет о результатах анализов пациента.
  • Когда производится профилактическое облуживание фотометра.
  • В интервалах установленных программой лабораторного контроля качества.

Расчеты:

340 нм: Ед/л = ∆OD/мин x 1746
334 нм: Ед/л = ∆OD/мин x 1780
365 нм: Ед/л = ∆OD/мин x 3235

Коэффициент пересчета: µKat/l = Ед/л x 0.0167.

Границы нормы:

В плазме с П-5-Ф при t 37°C Ед/л µkat/l
мужчины От 13 до 40 0.22 – 0.68
женщины От 10 до 28 0.17 – 0.48
младенцы От 13 до 45 0.22 – 0.77

Полученные значения должны быть оценены с историей болезни, клиническими обследованиями и другими анализами.

Метрологические характеристики:

Рабочие характеристики могут меняться в зависимости от используемой аппаратуры. Полученные данные в разных лабораториях могут отличаться от результатов, полученных в своей лаборатории.

Линейность: до 418 U/л (7 µkat/l).
Для образцов с большей концентрацией, разведите: 1:1 с 0.9% NaCl и еще раз подвергните анализу. Результат увеличить в 2 раза.

Интерференция :

Желтуха: нарушение менее 10% при показателях билирубина (и фракций) до 600 µмоль/л.
Гемолиз: нарушение менее 10% при показателях гемоглобина до 5 г/л.
Липемия: нарушение менее 10% при показателях триглицеридов до 5 г/л.

Чувствительность: 3,0 U/л (0.05 µkat/l).

Точность:

Внутрисерийная N = 20 Среднее значение (U/l) SD % CV Межсерийная N = 20 Среднее значение (U/l) SD % CV
Уровень 1 35 1.40 4.02 Уровень 1 36 1.48 4.12
Уровень 2 141 2.15 1.52 Уровень 2 138 2.69 1.96

Метод сравнения:
Сравнение 50 образцов с использованием этих реагентов АЛП (y) и другими доступными реагентами (x), дали следующие результаты.

y = 0.999x – 1.370 r = 0.999 Ранг образца: от 6 до 280 U/л

Символы:

Данные символы используются компанией Audit Diagnostics для краткого обозначения:


 В лаб. диагностике Каталожный номер
Код партии Состав
Реагент Антитело
Калибратор Субстрат
Буфер Стандарт растворимости
Продукция соответствует директиве 98/79/EC Восстанавливается с
Температура хранения
Срок хранения (последний день месяца) Производитель
Биологическая опасность Воспользуйтесь инструкцией по эксплуатации