АСТ (AST IFCC)

Audit Diagnostics – европейская надежность и качество химических реактивов для лабораторий различного профиля с 1993 года.

АСТ (AST IFCC)

УНИВЕРСАЛЬНЫЙ ЖИДКИЙ РЕАГЕНТ ХАРАКТЕРИСТИКИ НАБОРА:

Кат. №.	Количество	Реагент	Хранение
AD733AS	10 x 15 мл 2 x 15 мл	AST IFCC - 1 AST IFCC - 2	2-8°C
AD743AS	5 x 50 мл 1 x 50 мл	AST IFCC - 1 AST IFCC - 2	2-8°C
AD753AS	5 x 100 мл 1 x 100 мл	AST IFCC - 1 AST IFCC - 2	2-8°C

ПРЕДНАЗНАЧЕНИЕ:

In Vitro диагностике данный набор реагентов используется для количественного определения аспартата аминотрасферазы (AST) в сыворотке, плазме по рекомендации IFCC на автоматических и полуавтоматических анализаторах.

ТЕОРЕТИЧЕСКОЕ ОБОСНОВАНИЕ:

Аспартат аминотрасфераза (AST) принадлежит к группе ферментов, которые катализируют превращение аминокислот, перенося аминогруппы с аминокислоты на кетокислоту (2-оксоглютерат). Фермент в основном содержится в клетках цитоплазмы и в большой концентрации в сердечных, печеночных и скелетно-мышечных тканях. В клинической практике в основном используется для диагностики и лечения инфаркта миокарда и гепатита. После инфаркта миокарда уровень AST повышается через 6-8 часов после начала приступа. Он остается повышенным еще 4 дня, после чего приходит в норму на 4 день. Повышение AST в 5-10 раз в основном наблюдается при карциноме печени.

Пиридоксаль-5-Фосфат является коэнзим аминотрансферазы. Снижение активности аминотрасферазы может быть связана со снижением количества пиридоксаль-5-Фосфат, простетической группы аминотрасферазы.

Международная Федерация Клинической Химии (IFCC) рекомендует методы с добавлением перидоксаль-5-фосфата (добавляется к буферу). Перидоксаль-5-фосфат не входит в набор поставляется компанией Audit Diagnostics в виде порошка в бутылочках (Кат. № AD806PP (12 x 50 мл) и AD816PP (6 x 66 мл).

ПРИНЦИП МЕТОДА:

Образец с раствором буфера TRIS (гидроксимесил) аминометан содержащим
zL-аспарат, малат дегидрогеназы (MDH) и лактат дегидрогеназы (LDH)
предварительно выдерживают в инкубаторе. Реакция возникает при добавлении NADH и измеряется кинетически. Уровень расхода NADH прямо пропорционален концентрации AST в образце пациента.

МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ:

Реагенты можно использовать только профессионально для лабораторной диагностики.
Внимательно прочитайте инструкцию по работе с реагентами. Отклонения от порядка выполнения процедуры могут изменить показания анализа.

Цвет и вид компонентов:
Реагент 1: прозрачный бесцветный жидкость
Реагент 2: прозрачная светло-желтая жидкость

Любые незначительные изменения цвета могут означать, что анализ, возможно, выполнен некорректно. В этом случае обратитесь к программе лабораторного контроля качества. В случае серьезных повреждений флакона и/или крышки, результатом чего стала утечка и/или загрязнение реагента, не используйте комплект и обратитесь к дистрибьютору.

Меры безопасности:

В соответствии с европейскими стандартами продукт не представляет опасности. Данные реагенты содержат азид натрия. Техническая информация безопасности материалов предоставляется по запросу.

Меры предосторожности:

Не используйте просроченные реагенты, дата пригодности указанна на флаконе.
Не замораживайте реагенты.
Не используйте реагенты для других целей, кроме тех, которые указаны в разделе «ПРЕДНАЗНАЧЕНИЕ».
Не меняйте крышки флаконов между собой, это может привести к загрязнению реагентов, что, впоследствии, приведет к неправильным результатам анализа.
Следуйте требованиям по утилизации продукта.

ОБОРУДОВАНИЕ:

Описание по использованию оборудования предоставляется по запросу.

СОСТАВ НАБОРА:

Компоненты	Ингредиенты	Концентрация в тестах
Реагент 1	TRIS буфер pH 7.25	100 ммоль/л
	Л-аспартат	300 ммоль/л
	малатдегидрогеназа	> 530 U/l
	лактатдегидрогеназа	> 750 U/l
	стабилизаторы антикоагулянты	------
Реагент 2	α -кетоглутарат	75 ммоль/л
	НАДН	0.23 ммоль/л
	антикоагулянты	-----

ПРИГОТОВЛЕНИЕ РЕАГЕНТОВ И ИХ СТАБИЛЬНОСТЬ:

Перед использованием аккуратно перемешайте каждый флакон с реагентом.
При правильном хранении набора, неоткрытые реагенты остаются стабильными до окончания даты пригодности, указанной на этикетке. Монореагентная методика: смешайте 1 часть Реагента 2 с 5 частями
Реагента 1. При температуре 2-8°C рабочий реагент стабилен 5 недель.
Биреагентная методика: жидкие Реагенты 1и 2 готовы для использования.
После вскрытия, при правильном хранении, компоненты остаются стабильными до окончания срока годности (на бирке).

ИССЛЕДУЕМЫЙ МАТЕРИАЛ (ОБРАЗЕЦ):

Как образец используйте сыворотку, свободную от гемолиза, гепарин/EDTA плазму. При работе с образцами рекомендуется придерживаться требований NCCLS (или похожих условий стандартизации). Образец должен набираться только в специально предназначенный для этого контейнер. Сыворотку/плазму необходимо отделить от клеток крови в течение 48 часов после забора крови.
Стабильность образца: до 5 дней при 2-8°C.

МЕТОД КОНТРОЛЯ:
Необходимое оборудование (отсутствует в данном комплекте):

Описание	Кат. №	Описание	Кат. №
Калибратор	AD983	Фотометр	нет
Универсальные контрольные сыворотки Уровень 1	AD922	Общее лабораторное оборудование	нет
Универсальные контрольные сыворотки Уровень 2	AD932

Процедура определения:
Длина волны: λ= 340 нм (Hg 334-Hg 365)
Температура: 300C или 37°C
Оптический путь: 1 см.

Монореагентная методика	Бланк	Калибратор	Образец
Рабочий реагент	1000 µл	1000 µл	1000 µл
Образец	----	----	100 µл
Калибратор	-----	100 μл	-----
Аккуратно смешайте, инкубируйте1 мин. при 30°C или 37°C Измеряйте оптическую плотность каждую минуту в течение 3 минут и высчитайте среднее значение в минуту (∆OD/мин).

Факторные подсчеты:
340 нм: U/l = ∆OD/мин x 1746
334 нм: U/l = ∆OD/мин x 1780
365 нм: U/l = ∆OD/мин x 3235

Биреагентная методика:	Контрольная проба	Калибратор	Образец
Реагент 1	1000 µл	1000 µл	1000 µл
Образец	----	----	100 µл
Калибратор	----	100 µл	----
Аккуратно смешайте, инкубируйте 2 мин. при 37°C
Реагент 2	200 µл	200 µл	200 µл
Аккуратно смешайте, инкубируйте 1 мин. при 37°C В течение 4 минут измеряйте изменение оптического расстояния каждую минуту (∆OD/мин).

Факторные подсчеты:
340 нм: U/l = ∆OD/мин x 2063
334 нм: U/l = ∆OD/мин x 2103
365 нм: U/l = ∆OD/мин x 3823
*Вышеуказанные факторы должны быть указаны в инструкции к калибратору (AD973).

Калибровка:
Используя рекомендуемый калибратор, откалибруйте прибор:

Используете новый комплект реагентов или меняете номер партии
Производите профилактическое обслуживание или меняете неисправные детали фотометра.
Контроли качества за пределами допустимой нормы.

Контроль качества:
Все клинические лаборатории должны установить программу внутреннего контроля качества. Проводить проверку аппаратуры и реагентов при помощи рекомендуемого или схожего контроля. Оценка, полученная для контроля качества, должна соответствовать допустимым пределам производителя или должна быть установлена в соответствии с программой лабораторного контроля качества.
Контроли должны подвергаться анализу:

Когда получен предварительный отчет о результатах пациента.
Когда производится профилактическое облуживание фотометра.
В интервалах установленных программой лабораторного контроля качества.

РАСЧЕТЫ:
340 нм: U/l = ∆OD/мин x 1746
334 нм: U/l = ∆OD/мин x 1780
365 нм: U/l = ∆OD/мин x 3235
(Коэффициент пересчета: μkat/l = ед/л x 0 0167)

ГРАНИЦЫ НОРМЫ:

Универсальный метод IFCC	30°C* ед/л	30°C* µkat/l	37°C4 ед/л	37°C4 µkat/l
Мужчины	до 25	до 0.42	до 37	до 0.63
Женщины	до 21	до 0.36	до 31	до 0.53

* Расчетные единицы. Температурный коэффициент пересчета от 37°C до 30°C: 0.674,5.
Каждая лаборатория должна установить свою собственную нормированную область значений.

РАБОЧИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ:
Рабочие характеристики могут меняться в зависимости от используемой аппаратуры. Полученные данные в разных лабораториях могут отличаться от результатов, полученных в своей лаборатории.

Линейность:
Линейность до 412 U/l (6.8 µkat/l).
Для образцов с большей концентрацией, разведите: 1:1 с 0.9% NaCl и еще раз подвергните анализу. Результат увеличится в 2 раза.

Интерференция:

Желтуха: нарушение менее 12% при показателях билирубина (и фракций) до 200 µмоль/л.

Гемолиз: нарушение менее 12% при показателях гемоглобина до 1.25 г/л.

Липемия: нарушение менее 10% при показателях интралипидов до 5 г/л.

Чувствительность: 43 ед/л (0.05 µkat/l).

Точность:

Внутрисерийная N = 20	Среднее значение (ед/л)	SD	%CV	Межсерийная N = 20	Среднее значение (ед/л)	SD	% CV
Уровень 1	35.8	0.624	1.74	Уровень 1	40	1.09	2.74
Уровень 2	122.6	0.88	0.72	Уровень 2	133	2.94	2.22

Метод сравнения:
Сравнение 50 образцов с использованием этих реагентов АСТ (y) и другими доступными реагентами (x), дают следующие результаты.

y = 1.014x – 0.219

r = 0.999

Ранг образца: от 9 до 355 ед/л