Амилаза (IFCC)

Audit Diagnostics – европейская надежность и качество химических реактивов для лабораторий различного профиля с 1993 года.

Характеристика набора:

Кат. №.	Количество	Реагент	Хранение
AD183A	5x100 мл	AMYLASE - 1	2-8°C
AD183A	1x100 мл	AMYLASE - 2
AD193A	5 x 50 мл	AMYLASE - 1
AD193A	1 x 50 мл	AMYLASE - 2

Предназначение:

In Vitro диагностике данный набор реагентов используется для определения амилазы в сыворотке, плазме и моче по рекомендации IFCC на автоматических и полуавтоматических анализаторах.

Теоретическое обоснование:

В сыворотке человека присутствует два вида амилазы: слюнной (тип S) и панкреатический (тип P). Тип P находится практически только в клетках поджелудочной железы, тип S присутствует в клетках других тканей. Измерение амилазы широко используется для диагностики острого панкреатита, при этом показатели выше нормы в 50 раз. Повышенный уровень амилазы может означать почечную недостаточность, воспаление легких, заболевание слюнной железы, макроамилаземию.

Принцип метода:

Амилаза расщепляет субстрат этилиден (G7) p-нитрофенил 2-D мальтогептаозид. G2PNP, G3 PNP и G4 PNP полностью гидролизуются при помощи глюкозидазы до глюкозы и p-нитрофенола.

PNP = p-нитрофенол. G = глюкоза

Меры предосторожности:

Реагенты можно использовать только профессионально для лабораторной диагностики.
Внимательно прочитайте инструкцию по работе с реагентами. Отклонения от порядка выполнения процедуры могут изменить порядок выполнения анализа.

Цвет и вид компонентов:

Оба Реагента: прозрачная бесцветная жидкость.

Любые незначительные изменения цвета могут означать, что анализ, возможно, выполнен некорректно. В этом случае обратитесь к программе лабораторного контроля качества. В случае серьезных повреждений флакона и/или крышки, результатом чего стала утечка и/или загрязнение реагента, не используйте комплект и обратитесь к дистрибьютору.

Меры безопасности:

В соответствии с европейскими стандартами продукт не представляет опасности. Данные реагенты содержат азид натрия. Техническая информация безопасности материалов предоставляется по запросу.

Меры предосторожности:

Не используйте просроченные реагенты, дата пригодности указанна на флаконе.
Не замораживайте реагенты.
Не используйте реагенты для других целей, кроме тех, которые указаны в разделе «ПРЕДНАЗНАЧЕНИЕ».
Не меняйте крышки флаконов между собой, это может привести к загрязнению реагентов, что, впоследствии, приведет к неправильным результатам анализа.
Следуйте требованиям по утилизации продукта.

Оборудование:

Описание по использованию оборудования предоставляется по запросу.

Состав набора:
Компонент	Ингредиенты	Концентрация
Реагент 1	Hepes буфер pH 7.25	52 ммоль/л
	хлорид натрия	87 ммоль/л
	хлорид магния	12.6 ммоль/л
	хлорид кальция	0.075 ммоль/л
	а-глюкозидаза	4000 U/l
	антикоагулянты	-
Реагент 1	Hepes буфер pH 7.15	52 ммоль/л
	4,6-этилиден-G7-PNP	22 ммоль/л
	антикоагулянты	-

Приготовление реагентов и их стабильность:

Реагент 1 готов для использования.
Перед использованием аккуратно перемешайте каждый флакон с реагентом.
При правильном хранении набора, неоткрытые реагенты остаются стабильными до окончания даты пригодности, указанной на бирке.

Монореагентная методика: смешайте 1 часть Реагента 2 с 5 частями
Реагента 1. При температуре 2-8°C рабочий реагент стабилен 10 дней.

Биреагентная методика: жидкие Реагенты 1и 2 готовы для использования.
После вскрытия, при правильном хранении, компоненты остаются стабильными до окончания срока годности (на этикетке).

Исследуемый материал (Образец):

Как образец используйте сыворотку, гепарин/EDTA плазму или мочу. При работе с образцами рекомендуется придерживаться требований NCCLS (или похожих условий стандартизации). Образец должен набираться только в специально предназначенный для этого контейнер. Сыворотку/плазму необходимо отделить от клеток крови в течение 8 часов после забора крови.

Стабильность 2: до 2 месяцев при 2-8°C
Наберите мочу без консервантов. Разведите 1:3 с деионизированной водой. Коэффициент разбавления учесть при получении результата
Стабильность 3: до 10 дней при 2-8°C

Метод контроля:

Необходимое оборудование (отсутствует в данном комплекте):

Описание	Кат. №	Описание	Кат. №
Калибратор	AD983	Фотометр	нет
Универсальные контроли Уровень 1	AD922	Общее лабораторное оборудование	нет
Универсальные контроли Уровень 2	AD932

Процедура определения:

Длина волны: λ 405 нм
Температура: 30°C
Оптический путь: 1 см

Монореагентная методика	Бланк	Калибратор	Образец
Рабочий реагент	1000 μл	1000 μл	1000 μл
Образец	-	-	30 μл
Калибратор	-	30 μл	-
Аккуратно смешать компоненты, перемешать, инкубировать 3 мин. при 30°C или 37°C. В течение следующих 3 минут измеряйте абсорбцию каждую минуту (∆OD/мин).

Биреагентная методика:	Контрольная (холостая) проба	Калибратор	Образец
Рабочий реагент	1000 μл	1000 μл	1000 μл
Образец	-	-	30 μл
Калибратор	-	30 μл	-
Аккуратно смешайте и выдержите 5 мин. в термостате при 37°C
Реагент 2	200 μл	200 μл	200 μл
Аккуратно смешать компоненты, перемешать, инкубировать 3 мин. при 37°C В течение следующих 4 минут измеряйте абсорбцию каждую минуту (∆OD/мин).

Калибровка:
К-фактор необходимо определять чистым калибратором.
Используя рекомендуемый калибратор, откалибруйте прибор, если:

Используете новый набор или меняете номер партии реагентов.
Производите профилактическое обслуживание или меняете неисправные детали фотометра.
Контроли качества за пределами допустимой нормы.

Контроль качества:
Все клинические лаборатории должны установить программу внутреннего контроля качества. Проводить проверку аппаратуры и реагентов при помощи рекомендуемого или схожего контроля. Оценка, полученная для контроля качества, должна соответствовать допустимым пределам производителя или должна быть установлена в соответствии с программой лабораторного контроля качества.

Контроли должны подвергаться анализу:

Когда получен предварительный отчет о результатах анализов пациента.
Когда производится профилактическое облуживание фотометра.
В интервалах установленных программой лабораторного контроля качества.

Расчеты:

Концентрация = (∆Abs/min(образец)/∆Abs/min(калибратор)) * Концентрация калибратора
Коэффициент пересчета: μКat/l = U/l x 0.0167.

Границы нормы:

	ед/л при 37°C	µkat/l при 37°C
Сывортка/плазма	От 28 до 100	0.47 – 1.67
Моча	460	7.67

*Содержание в плазме приблизительно ниже содержания в сыворотке на 8%.
Полученные значения должны быть оценены с историей болезни, клиническими обследованиями и другими анализами.
Каждая лаборатория должна установить свою собственную нормированную область значений.

Метрологические характеристики:

Рабочие характеристики могут меняться в зависимости от используемой аппаратуры. Полученные данные в разных лабораториях могут отличаться от результатов, полученных в своей лаборатории.

Линейность: до 1988 ед/л (33 µkat/l).
Для образцов с большей концентрацией, разведите: 1:1 с 0.9% NaCl. Результат соответственно увеличить в 2 раза.

Интерференция :

Желтуха: нарушение менее 10% при показателях билирубина (и фракций) до 600 µмоль/л.
Гемолиз: нарушение менее 10% при показателях гемоглобина до 5 г/л.
Липемия: нарушение менее 10% при показателях интралипидов до 5 г/л.

Чувствительность: 1,0 ед/л (0,016 µkat/l)

Точность:
Воспроизводимость устанавливалась во внутреннем протоколе в серии N=20, между сериями N=20.

Внутрисерийная N = 20	Среднее значение (ед/л)	SD	% CV	Межсерийная N = 20	Среднее значение (U/l)	SD	% CV
Уровень 1	159.5	1.02	0.64	Уровень 1	160.2	0.96	0.60
Уровень 2	417.5	2.42	0.58	Уровень 2	416.4	3.84	0.92

Метод сравнения:
Сравнение 50 образцов с использованием этих реагентов амилазы (y) и другими доступными реагентами (x), дают следующие результаты.

y = 0.930x – 3 .067

r = 1.000

Ранг образца: от 30 до 2002 ед/л

Символы:

Данные символы используются компанией Audit Diagnostics для краткого обозначения:

	В лаб. диагностике		Каталожный номер
	Код партии		Состав
	Реагент		Антитело
	Калибратор		Субстрат
	Буфер		Стандарт растворимости
	Продукция соответствует директиве 98/79/EC		Восстанавливается с
	Температура хранения
	Срок хранения (последний день месяца)		Производитель
	Биологическая опасность		Воспользуйтесь инструкцией по эксплуатации