Щелочная фосфатаза (ALP DGKC)

печать

Audit Diagnostics – европейская надежность и качество химических реактивов для лабораторий различного профиля с 1993 года.

Характеристика набора:

Кат. №. Количество Реагент Хранение
AD701AP 10 x15 мл
2 x 15 мл		 АЛП DGKC - 1 ALP 2-8°C
2-8°C
AD711AP 5 x 50 мл
1 x 50 мл		 АЛП DGKC - 1 ALP 2-8°C
2-8°C

Предназначение:

In Vitro диагностике данный комплект реагентов используется для количественного определения щелочной фосфатазы (АЛП) в сыворотке и плазме, рекомендованного Германским обществом клинической химии (DGKC), на автоматических и полуавтоматических анализаторах.

Теоретическое обоснование:

Щелочная фосфатаза - гидролитический фермент, который катализирует отщепление фосфорной кислоты от ее органических соединений. Энзим присутствует в различных тканях, включая кости, печень, кишечник, плаценту, почки и селезенку.

Повышение уровня щелочной фосфатазы используется в диагностике костных заболеваний, связанных с повышением остеобластической активности. Повышенная остеобластическая активность связана с ростом костей у детей и подростков.

Принцип метода:

Кинетический метод используется согласно рекомендациям Германского общества клинической химии DGKC.

Меры предосторожности:

Реагенты можно использовать только профессионально для лабораторной диагностики. Внимательно прочитайте инструкцию по работе с реагентами. Отклонения от порядка выполнения процедуры могут изменить порядок выполнения анализа.

Цвет и вид компонентов:

Реагент 1: Прозрачная бесцветная жидкость.

Прозрачная, светло-желтая жидкость (имеет тенденцию темнеть в зависимости от возраста пациента, но на показатели анализа не влияет3). Любые незначительные изменения цвета могут означать, что анализ, возможно, выполнен некорректно. В этом случае обратитесь к программе лабораторного контроля качества. В случае серьезных повреждений флакона и/или крышки, результатом чего стала утечка и/или загрязнение реагента, не используйте комплект и обратитесь к дистрибьютору.

Меры безопасности:

Внимание: Данные реагенты содержат азид натрия, поэтому придерживайтесь всех необходимых мер безопасности при работе с ними в лаборатории. Техническая информация безопасности материалов предоставляется по запросу.

Меры предосторожности:

  • Не используйте просроченные реагенты, дата пригодности указанна на флаконе.
  • Не замораживайте реагенты.
  • Не используйте реагенты для других целей, кроме тех, которые указаны в разделе «ПРЕДНАЗНАЧЕНИЕ».
  • Не меняйте крышки флаконов между собой, это может привести к загрязнению реагентов, что, впоследствии, приведет к неправильным результатам анализа.
  • Следуйте требованиям по утилизации продукта.

Оборудование:

Описание по использованию оборудования предоставляется по запросу.

Состав набора:
Компонент Ингредиенты Концентрация
Реагент 1 Диэтаноламиновый буфер pH 9.8 1 моль/л
Хлорид магния 0.51 ммоль/л
Реагент 2 P-Нитрофенол-Фосфат 61.0 ммоль/л
Антикоагулянты -

Приготовление реагентов и их стабильность:

Перед использованием аккуратно перемешайте каждый флакон с реагентом.
При правильном хранении набора, неоткрытые реагенты остаются стабильными до окончания даты пригодности, указанной на бирке.
Монореагентная методика: смешайте 1 часть Реагента 1 с 5 частями Реагента 2.
При температуре 2-8°C рабочий реагент стабилен 4 недели.
Биреагентная методика: жидкие Реагенты 1и 2 готовы для использования.
После вскрытия, при правильном хранении, компоненты остаются стабильными до окончания срока годности (на бирке).

Исследуемый материал (Образец):

Как образец используйте сыворотку или гепаринизированную плазму, свободную от гемолиза. НЕ ИСПОЛЬЗОВАТЬ: цитрат, оксалат и этилендиаминтетрауксусную кислоту. В работе с образцом рекомендуется придерживаться методики работы NCCLS (или похожих условий стандартизации). Образец необходимо набрать в соответствующий контейнер, предназначенный для этого образца. Сыворотка должна быть отделена от клеток сразу же после забора. Сыворотку/плазму необходимо отделить от клеток крови в течение 2 часов после забора крови. Стабильность: до 7 дней при температуре 2-8°C.

Стабильность:до 3 дней при 4°C.

Метод контроля:

Необходимое оборудование (отсутствует в данном комплекте):

Описание Кат. № Описание Кат. №
Калибратор AD983 Фотометр нет
Универсальные контроли Уровень 1 AD922 Общее лабораторное оборудование нет
Универсальные контроли Уровень 2 AD932

Процедура определения:

Длина волны: λ 405 нм (410 нм)
Температура: 25°C (30°C или 37°C)
Кювета с длиной оптического пути: 1 см

Монореагентная методика Контрольная проба Калибратор Образец
Рабочий реагент 1000 μл 1000 μл 1000 μл
Образец - - 20 μл
Калибратор - 20 μл -
Аккуратно смешайте и инкубируйте 1 мин. при 30°C (37°C). Измеряйте оптическую плотность в течение 1,2,3 минут и высчитайте среднее значение в минуту (∆OD/мин).


Биреагентная методика: Контрольная проба Калибратор Образец
Реагент 1 1000 μл 1000 μл 1000 μл
Образец - - 6 μл
Калибратор - 20 μл -
Аккуратно смешайте и инкубируйте 2 мин. при 37°C
Реагент 2 200 μл 200 μл 200 μл
Аккуратно смешайте и инкубируйте 1 мин. при 37°C
Измеряйте оптическую плотность в течение 4 минут, найдите среднее значение оптической плотности в минуту (∆OD/мин).

Факторный расчет:
405 нм: U/l =∆OD/мин x 2757
410 нм: U/l =∆ODмин x 2014
*Вышеуказанные факторы должны быть указаны в инструкции к калибратору (AD973).

Калибровка:
Используя рекомендуемый калибратор, откалибруйте прибор:

  • Используете новый набор или меняете номер партии реагентов.
  • Производите профилактическое обслуживание или меняете неисправные детали фотометра.
  • Контроли качества за пределами допустимой нормы.

Контроль качества:
Все клинические лаборатории должны установить программу внутреннего контроля качества. Проводить проверку аппаратуры и реагентов при помощи рекомендуемого или схожего контроля. Оценка, полученная для контроля качества, должна соответствовать допустимым пределам производителя или должна быть установлена в соответствии с программой лабораторного контроля качества.

Контроли должны подвергаться анализу:

  • Когда получен предварительный отчет о результатах анализов пациента.
  • Когда производится профилактическое облуживание фотометра.
  • В интервалах установленных программой лабораторного контроля качества.

Расчеты:

405 нм: U/l =∆OD/мин x 2757
410 нм: U/l =∆АODмин x 2014
*Вышеуказанные факторы должны быть указаны в инструкции к калибратору (AD973).

(Коэффициент пересчета: µKat/l = U/l x 0.0167).

Ожидаемые показатели:

Диапазон по Росалки4 U/l при 25°C µKat/l при 25°C U/l при 30°C* µKat/l при 30°C* U/l при 37° C* µKat/l при 37° C*
мужчины < 180 < 3.06 < 220 < 3.74 < 270 < 4.59
женщины <160 < 2.72 < 195 < 3.32 < 240 < 4.08

Единицы измерения.
*Температурный коэффициент пересчета от 25°C до 30°C: 1.24 и до 37°C: 1.52

Каждая лаборатория должна установить свою собственную нормированную область значений. Полученные результаты АЛП всегда необходимо сравнивать с результатами анализов пациента и его историей болезни.

Метрологические характеристики:

Рабочие характеристики могут меняться в зависимости от используемой аппаратуры. Полученные данные в разных лабораториях могут отличаться от результатов, полученных в своей лаборатории.

Линейность: до 1524 U/l (25.9 µKat/l).
Для образцов с большей концентрацией, разведите: 1:1 с 0.9% NaCl и еще раз подвергните анализу. Результат увеличить в 2 раза.

Интерференция :

Желтуха: нарушение менее 10% при показателях билирубина (и фракций) до 600 µмоль/л.
Гемолиз: нарушение менее 10% при показателях гемоглобина до 5 г/л.
Липемия: нарушение менее 10% при показателях триглицеридов до 5 г/л.

Чувствительность: 4.0 U/l (0.068 µKat/l).

Точность:

Внутрисерийная N = 20 Среднее значение (U/l) SD % CV Межсерийная N = 20 Среднее значение (U/l) SD % CV
Уровень 1 171 1.37 0.78 Уровень 1 176 5.66 3.21
Уровень 2 454 2.99 0.66 Уровень 2 441 9.76 2.22

Метод сравнения:
Сравнение 50 образцов с использованием этих реагентов АЛП (y) и другими доступными реагентами (x), дали следующие результаты.

y = 1.139x – 6.453 r =0.998 Ранг образца: от 48 до 577 U/l

Символы:

Данные символы используются компанией Audit Diagnostics для краткого обозначения:


 В лаб. диагностике Каталожный номер
Код партии Состав
Реагент Антитело
Калибратор Субстрат
Буфер Стандарт растворимости
Продукция соответствует директиве 98/79/EC Восстанавливается с
Температура хранения
Срок хранения (последний день месяца) Производитель
Биологическая опасность Воспользуйтесь инструкцией по эксплуатации