Биохимические реагенты » Холестерин липопротеинов низкой плотности LDL

Холестерин липопротеинов низкой плотности LDL

Audit Diagnostics – европейская надежность и качество химических реактивов для лабораторий различного профиля с 1993 года.

ХОЛЕСТЕРИН ЛИПОПРОТЕИНОВ НИЗКОЙ ПЛОТНОСТИ (LDL)

УНИВЕРСАЛЬНЫЙ ЖИДКИЙ РЕАГЕНТ

ХАРАКТЕРИСТИКИ НАБОРА:

Кат. №.	Количество	Реагент	Хранение
AD605LL	2 x 45 мл	ХС-ЛПНП - 1	2-8°C
	2 x 15 мл	ХС-ЛПНП - 2
	1 x 1мл	ХС-ЛПНП - Калибратор
AD615LL	2 x 90 мл	ХС-ЛПНП - 1
	2 x 30 мл	ХС-ЛПНП - 2
	1 x 1мл	ХС-ЛПНП - Калибратор

ПРЕДНАЗНАЧЕНИЕ:

In Vitro диагностике данный набор реагентов используется для определения холестерина липопротеинов низкой плотности в сыворотке и плазме на автоматических и полуавтоматических анализаторах.

ТЕОРЕТИЧЕСКОЕ ОБОСНОВАНИЕ:

Общеизвестно, что уровень общего холестерина в крови связывают с ишемической болезнью сердца (ИБС). В последнее время, кроме показателей общего холестерина, начали учитывать показания холестерина липопротеинов низкой плотности для диагностики ИБС. Таким образом, определение ХС-ЛПНП вызывают огромный интерес у специалистов. В настоящее время основной методикой определения ХС-ЛПНП является метод ультрацентрифугирования. Так как этот процесс достаточно трудоемкий, его не применяют для ежедневных исследований. Для повседневных методик пользуются расчетной формулой Фридвальда. Однако, подсчеты ХС-ЛПНП зависят от погрешности и точности измерений трех составляющих: общего холестерина, триглицеридов и холестерина липопротеинов высокой плотности. Для такого гомогенного анализа компания Audit Diagnostics предлагает тест типа "L", который устраняет подготовительные этапы или расчеты и может использоваться на автоматических и полуавтоматических анализаторах.

ПРИНЦИП МЕТОДА:

При добавлении к образцу реагента 1, защитный реагент соединяется с ЛПНП и защищает их от реакций ферментов. CHE (холестеролэстераза) и CO (холестеролоксидаза) реагируют с остальными фракциями липопротеинов. Перекись водорода, образованная в ходе реакции энзима с холестерином промежуточной плотности разлагается под действием реагента 1. При добавлении реагента 2, защитный реагент высвобождение ЛПНП из комплекса и при помощи азида натрия активизируется каталаза. В процессе второй реакции CHE и CO реагируют только с ЛПНП. Под действием окислителя с HDAOS и 4-AA в присутствии пероксидазы (POD) перекись водорода образует цветной комплекс. Интенсивность окраски голубого комплекса прямо пропорциональна содержанию ЛПНП в образце. Анализ состоит из двух этапов: удаление хиломикронов и ЛПНП и удаление ХС-ЛПВП при помощи холестеролэстеразы и ферментов оксидазы.

МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ:

Реагенты можно использовать только профессионально для лабораторной диагностики. Внимательно прочитайте инструкцию по работе с реагентами. Отклонения от порядка выполнения процедуры могут изменить порядок выполнения анализа.

Цвет и вид компонентов:

Реагент 1: Прозрачная бесцветная жидкость.
Реагент 2: Прозрачная светло-желтая жидкость
Калибратор: Лиофильный осадок.

Любые незначительные изменения цвета могут означать, что анализ, возможно, выполнен некорректно. В этом случае обратитесь к программе лабораторного контроля качества. В случае серьезных повреждений флакона и/или крышки, результатом чего стала утечка и/или загрязнение реагента, не используйте комплект и обратитесь к дистрибьютору.

Меры безопасности:
Внимание: придерживайтесь всех необходимых мер безопасности при работе с реагентами в лаборатории. Техническая информация безопасности материалов предоставляется по запросу.

Меры предосторожности:

Не используйте просроченные реагенты, дата пригодности указанна на флаконе.
Не замораживайте реагенты.
Не используйте реагенты для других целей, кроме тех, которые указаны в разделе «ПРЕДНАЗНАЧЕНИЕ».
Не меняйте крышки флаконов между собой, это может привести к загрязнению реагентов, что, впоследствии, приведет к неправильным результатам анализа.
Следуйте требованиям по утилизации продукта.

ОБОРУДОВАНИЕ:

Описание по использованию оборудования предоставляется по запросу.

СОСТАВ НАБОРА:

Компонент	Ингредиенты
Реагент 1	GOOD'S буфер
	Холестеролэстераза (CHE)
	Холестеролоксидаза (CO)
	4-аминоантипирин (4-AA)
	Пероксидаза
	MgCl2
	Детергент
Реагент 2	GOOD'S буфер
	Детергент
	TODB
	Антикоагулянт

ПРИГОТОВЛЕНИЕ РЕАГЕНТОВ И ИХ СТАБИЛЬНОСТЬ:

Реагент 1и 2 готовы для использования.
Перед использованием аккуратно перемешайте каждый флакон с реагентом.
При правильном хранении набора, неоткрытые реагенты остаются стабильными до окончания даты пригодности, указанной на этикетке.

Калибратор: аккуратно снимите крышку, чтобы не рассыпать лиофильный материал. Перезагрузите калибратор, используя 1мл дистиллированной воды, и дайте ему отстояться 30 минут перед использованием. Калибратор стабилен 7 дней при 2-8 oC или 1 месяц при -20oC с момента перезагрузки. Открытые материалы стабильны до окончания даты пригодности, указанной на этикетке. Компоненты калибратора заказываются отдельно. Перед использованием проверьте, чтобы номер на флаконе совпадал с номером на калибраторе.

ИССЛЕДУЕМЫЙ МАТЕРИАЛ (ОБРАЗЕЦ):

Как образец используйте сыворотку или гепаринизированную плазму. При работе с образцами рекомендуется придерживаться требований NCCLS (или похожих условий стандартизации). Образец должен набираться только в специально предназначенный для этого контейнер. Сыворотку/плазму необходимо отделить от клеток крови в течение 2 часа после забора крови. Перед использование, охладите образец при 4oC. Для длительного хранение, образцы необходимо заморозить при
-70oC или ниже.

МЕТОД КОНТРОЛЯ:

Необходимое оборудование (отсутствует в данном комплекте):

Описание	Кат. №	Описание	Кат. №
Холестериновые контроли Уровень 1 Липидные контроли Уровень 1	AD9041 AD9009	Фотометр	Нет
Холестериновые контроли Уровень 2 Липидные контроли Уровень 2	AD9051 AD9019	Общее лабораторное оборудование	Нет

Процедура определения:
Длина волны: λ 600 нм
Температура: 37°C
Оптический путь: 1 см

	Бланк	Калибратор	Образец
Реагент 1	900 µл	900 µл	900 µл
Образец	----	----	10 µл
Калибратор	----	10 µл	----
Аккуратно перемешайте и инкубируйте при 37°C. Измеряйте оптическую плотность реагента(OD1) через 5 мин.
Реагент 2 300 µл 300 µл 300 µл
Аккуратно перемешайте и инкубируйте при 37°C. Измеряйте оптическую плотность реагента(OD2) через 5 мин.

Калибровка:

Используя рекомендуемый калибратор, откалибруйте прибор:

Используете новый набор или меняете номер партии реагентов.
Производите профилактическое обслуживание или меняете неисправные детали фотометра.
Контроли качества за пределами допустимой нормы.

Контроль качества:
Все клинические лаборатории должны установить программу внутреннего контроля качества. Проводить проверку аппаратуры и реагентов при помощи рекомендуемого или схожего контроля. Оценка, полученная для контроля качества, должна соответствовать допустимым пределам производителя или должна быть установлена в соответствии с программой лабораторного контроля качества.
Контроли должны подвергаться анализу:

Когда получен предварительный отчет о результатах анализов пациента.
Когда производится профилактическое облуживание фотометра.
В интервалах установленных программой лабораторного контроля качества.

РАСЧЕТЫ:

Концентрация ХС-ЛПНП = OD образца /OD калибратора x Концентрация калибратора

Коэффициент пересчета: ммоль/л = мг/дл х 0.0259.
*Фотометр обнуляется по бланку.

ГРАНИЦЫ НОРМЫ:

Классификация NCEP ЛХ НП (мг/дл)	Взрослые (мг/дл)	Взрослые (ммоль/л)	Дети/подростки (мг/дл)	Дети/подростки (ммоль/л)
Желательный	< 130	<3.36	< 110	< 2.85
Граничный	130 to 160	3.36 – 4.15	110 to 120	2.85 – 3.11
Высокий	≥ 160	>4 15	≥ 130	>3.37

Каждая лаборатория должна установить свою собственную нормированную область значений. Полученные результаты всегда необходимо сравнивать с результатами анализов пациента и его историей болезни.

МЕТРОЛОГИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ:

Рабочие характеристики могут меняться в зависимости от используемой аппаратуры. Полученные данные в разных лабораториях могут отличаться от результатов, полученных в своей лаборатории.

Линейность: до 385 мг/дл (10 ммоль/л).
Для образцов с большей концентрацией, разведите: 1:1 с 0.9% NaCl и еще раз подвергните анализу. Результат увеличить в 2 раза.

Интерференция:

Желтуха: нарушение менее 10% при показателях неконьюгированного билирубина до 50 мг/дл.

Желтуха: нарушение менее 10% при показателях коньюгированного билирубина до 40 мг/дл.

Гемолиз: нарушение менее 10% при показателях гемоглобина до 500 мг/дл.

Аскорбиновая кислота: нарушение менее 10% при показателях аскорбиной кислоты до 50 мг/дл.

Метод сравнения:

Сравнение 20 образцов с использованием этих реагентов ХС-ЛПНП (y) и другими доступными реагентами (x), дают следующие результаты.

y = 0.9338x + 3.6259

r = 0.9121