Биохимические реагенты » Холестерин липопротеинов высокой плотности (HDL)

Холестерин липопротеинов высокой плотности (HDL)

Audit Diagnostics – европейская надежность и качество химических реактивов для лабораторий различного профиля с 1993 года.

ХОЛЕСТЕРИН ЛИПОПРОТЕИНОВ ВЫСОКОЙ ПЛОТНОСТИ (ХС-ЛПВП)

УНИВЕРСАЛЬНЫЙ ЖИДКИЙ РЕАГЕНТ

ХАРАКТЕРИСТИКА НАБОРА:

Кат. №.	Количество	Реагент	Хранение
AD602HD	2x45 мл	ХС-ЛПВП -1	2-8°C
	2x15 мл	ХС-ЛПВП -1
	1X1мл	ХС-ЛПВП -Калибратор
AD612HD	2x90 мл	ХС-ЛПВП -1	2-8°C
	2x30 мл	ХС-ЛПВП -1
	1X1мл	ХС-ЛПВП -Калибратор
AD622HD	4x90 мл	ХС-ЛПВП -1	2-8°C
	4x30 мл	ХС-ЛПВП -1
	1X1мл	ХС-ЛПВП -Калибратор

ПРЕДНАЗНАЧЕНИЕ:

In Vitro диагностике данный набор реагентов используется для прямого определения холестерина липопротеинов высокой плотности в сыворотке и плазме на автоматических и полуавтоматических анализаторах.

ТЕОРЕТИЧЕСКОЕ ОБОСНОВАНИЕ:

Давно известно, что уровень общего холестерина в крови связывают с ишемической болезнью сердца. В последнее время, кроме показателей общего холестерина, начали учитывать показания холестерина липопротеинов высокой плотности для диагностики ишемической болезни сердца. Была выявлена зависимость между концентрацией ХС-ЛПВП и частотой заболеваемости ишемической болезнью сердца. Селективные методики, такие как гепарин с марганцем, декстран с магнием и фосфоровольфрамовая кислота с магнием, широко используются для определения ХС-ЛПВП.

ПРИНЦИП МЕТОДА:

Полианионы и поверхностно-активное вещество в Реагенте 1 селективно связывают ЛПНП, ОЛПНП и хиломикроны. ХС-ЛПВП реагируют с CHE (холестеролэстераза) и CO (холестеролоксидаза), образуя свободные жирные кислоты и H2O2. 4-AA/HSDA в присутствии POD (пероксидазы) и H2O2 превращается в голубой комплекс. Количество образованного комплекса прямо пропорционально концентрации ХС-ЛПВП в образце.

МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ:

Реагенты можно использовать только профессионально для лабораторной диагностики. Внимательно прочитайте инструкцию по работе с реагентами. Отклонения от порядка выполнения процедуры могут изменить порядок выполнения анализа.

Цвет и вид компонентов:

Реагент 1: Прозрачная бесцветная жидкость.
Реагент 2: Прозрачная светло-желтая жидкость.
Калибратор: Лиофильный осадок.

Любые незначительные изменения цвета могут означать, что анализ, возможно, выполнен некорректно. В этом случае обратитесь к программе лабораторного контроля качества. В случае серьезных повреждений флакона и/или крышки, результатом чего стала утечка и/или загрязнение реагента, не используйте комплект и обратитесь к дистрибьютору.

Меры безопасности:

Внимание: придерживайтесь всех необходимых мер безопасности при работе с реагентами в лаборатории. Техническая информация безопасности материалов предоставляется по запросу.

Меры предосторожности:

Не используйте просроченные реагенты, дата пригодности указанна на флаконе.
Не замораживайте реагенты.
Не используйте реагенты для других целей, кроме тех, которые указаны в разделе «ПРЕДНАЗНАЧЕНИЕ».
Не меняйте крышки флаконов между собой, это может привести к загрязнению реагентов, что, впоследствии, приведет к неправильным результатам анализа.
Следуйте требованиям по утилизации продукта.

ОБОРУДОВАНИЕ:

Описание по использованию оборудования предоставляется по запросу.

СОСТАВ НАБОРА:
Компонент	Ингредиенты
Реагент 1	TODB
	Аскорбатоксидаза
	PVS
	PEGME
	MgCl2
	Буфер (pH 6.5)
Реагент 2	Буфер (pH 6.5)
	Холестеролэстераза(CHE)
	Холестеролоксидаза(CO)
	Пероксидаза (POD)
	4-аминоантипирин (AA)

ПРИГОТОВЛЕНИЕ РЕАГЕНТОВ И ИХ СТАБИЛЬНОСТЬ:

Реагент 1и 2 готовы для использования.

Перед использованием аккуратно перемешайте каждый флакон с реагентом.
При правильном хранении набора, неоткрытые реагенты остаются стабильными до окончания даты пригодности, указанной на этикетке.

Калибратор: аккуратно снимите крышку, чтобы не рассыпать лиофильный материал. Перезагрузите калибратор, используя 1мл дистиллированной воды, и дайте ему отстояться 30 минут перед использованием. Калибратор стабилен 7 дней при 2-8 oC или 1 месяц при -20oC с момента перезагрузки. Открытые материалы стабильны до окончания даты пригодности, указанной на этикетке. Компоненты калибратора заказываются отдельно. Перед использованием проверьте, чтобы номер на флаконе совпадал с номером на калибраторе.

ИССЛЕДУЕМЫЙ МАТЕРИАЛ (ОБРАЗЕЦ):

Как образец используйте сыворотку или гепаринизированную плазму. При работе с образцами рекомендуется придерживаться требований NCCLS (или похожих условий стандартизации). Образец должен набираться только в специально предназначенный для этого контейнер. Сыворотку/плазму необходимо отделить от клеток крови в течение 2 часа после забора крови. Рекомендуется измерять ЛХ ВП немедленно после забора крови.

МЕТОД КОНТРОЛЯ:

Необходимое оборудование (отсутствует в данном комплекте):

Описание	Кат. №	Описание	Кат. №
Холестериновые контроли Уровень 1 Липидные контроли Уровень 1	AD9041 AD9009	Фотометр	Нет
Холестериновые контроли Уровень 2 Липидные контроли Уровень 2	AD9051 AD9019	Общее лабораторное оборудование	Нет

Процедура определения:
Длина волны: λ 600 нм
Температура: 37°C
Оптический путь: 1 см

	Бланк	Калибратор	Образец
Реагент 1	900 µл	900 µл	900 µл
Образец	----	----	10 µл
Калибратор	----	10 µл	----
Аккуратно перемешайте и инкубируйте при 37°C. Измеряйте оптическую плотность реагента(OD1) через 5 мин.
Реагент 2 300 µл 300 µл 300 µл
Аккуратно перемешайте и инкубируйте при 37°C. Измеряйте оптическую плотность реагента(OD2) через 5 мин. Калибровка: OD= Образец/калибратор (OD1- OD2) – Реагент (OD1- OD2)

Калибровка:
Используя рекомендуемый калибратор, откалибруйте прибор:

Используете новый комплект реагентов или меняете номер партии
Производите профилактическое обслуживание или меняете неисправные детали фотометра.
Контроли качества за пределами допустимой нормы.

Контроль качества:
Все клинические лаборатории должны установить программу внутреннего контроля качества. Проводить проверку аппаратуры и реагентов при помощи рекомендуемого или схожего контроля. Оценка, полученная для контроля качества, должна соответствовать допустимым пределам производителя или должна быть установлена в соответствии с программой лабораторного контроля качества.

Контроли должны подвергаться анализу:

Когда получен предварительный отчет о результатах анализов пациента.
Когда производится профилактическое облуживание фотометра.
В интервалах установленных программой лабораторного контроля качества.

РАСЧЕТЫ:

Концентрация ХС-ЛПВП = OD образца/OD калибратора x Концентрация калибратора

Коэффициент пересчета: ммоль/л = мг/дл х 0.0259.

ГРАНИЦЫ НОРМЫ:

Возраст	Мужчины (ммоль/л)	Женщины (мг/дл)	Женщины (ммоль/л)	Мужчины (мг/дл)
<60 лет	0.78 – 1.63	30 – 63	0.85 – 2.25	33 – 87
>60 лет	0.78 – 1.94	30 – 75	0.85 – 2.49	33 – 96

Каждая лаборатория должна установить свою собственную нормированную область значений. Полученные результаты всегда необходимо сравнивать с результатами анализов пациента и его историей болезни.

МЕТРОЛОГИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ:

Рабочие характеристики могут меняться в зависимости от используемой аппаратуры. Полученные данные в разных лабораториях могут отличаться от результатов, полученных в своей лаборатории.

Линейность: до 100 мг/дл (2.58 ммоль/л).
Для образцов с большей концентрацией, разведите: 1:1 с 0.9% NaCl (9г/л) и еще раз подвергните анализу. Результат увеличить в 2 раза.

Интерференция:

Желтуха: нарушение менее 10% при показателях билирубина (и фракций) до 20 мг/дл.

Гемолиз: нарушение менее 10% при показателях гемоглобина до 5 г/л.

Липемия: нарушение менее 10% при показателях триглицеридов до 800 мг/дл.

Аскорбиновая кислота: нарушение менее 10% при показателях аскорбиновой кислоты до 50 мг/дл.

Глюкоза: нарушение менее 10% при показателях глюкозы до 2400 мг/дл.

Холестерин: нарушение менее 10% при показателях холестерина до 500 мг/дл.

Метод сравнения:

Сравнение 20 образцов с использованием этих реагентов ХС-ЛПВП (y) и другими доступными реагентами (x), дают следующие результаты.

y = 1.2238x - 7.3922

r = 0.964

Ранг образца: от 20 до 100 мг/дл