Лактатдегидрогеназа (LDH L-P)

печать

Audit Diagnostics – европейская надежность и качество химических реактивов для лабораторий различного профиля с 1993 года.

Лактатдегидрогеназа (LDH L-P)

УНИВЕРСАЛЬНЫЙ ЖИДКИЙ РЕАГЕНТ

ХАРАКТЕРИСТИКА КОМПЛЕКТА:

Кат. № Количество Реагент Хранение
AD769LD 5 x 43 мл
5 x 17 мл		 ЛДГ (L-P) - 1
ЛДГ (L-P) - 2		 2-8°C
2-8°C
AD779LD 10x13 мл
3x18 мл		 ЛДГ (L-P) -1
ЛДГ (L-P) - 2		 2-8°C
2-8°C

ПРЕДНАЗНАЧЕНИЕ:

In Vitro диагностике данный набор реагентов используется для определения лактатдегидрогеназы (ЛДГ) в сыворотке на автоматических и полуавтоматических анализаторах.

ТЕОРЕТИЧЕСКОЕ ОБОСНОВАНИЕ:

Лактатдегидрогеназа (LDH) локализируется в цитоплазме. Наибольшая концентрация ЛДГ в скелетных мышцах, печени, сердце, почках и эритроцитах. Существует как минимум 5 изоэнзимов (изоферментов) состоящих из 4 субъединиц пептидов двух разных типов, обозначенный буквой «М» для скелетной мышцы и «Н» для сердечной. Так как ЛДГ не является органоспецифическим энзимом ткани, то является показателем различных нарушений организма, таких как: вирусный гепатит, цирроз и рак печени, сердечные заболевания (инфаркт миокарда), опухоль на легких, гемолитические заболевания и заболевания почек.

ПРИНЦИП МЕТОДА:

Кинетический метод заключается в следующем:

МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ:

Реагенты можно использовать только профессионально для лабораторной диагностики.
Внимательно прочитайте инструкцию по работе с реагентами. Отклонения от порядка выполнения процедуры могут изменить порядок выполнения анализа.

Компоненты цвета и вида:
Оба реагента – прозрачные бесцветные жидкости.
Любые незначительные изменения цвета могут означать, что анализ, возможно, выполнен некорректно. В этом случае обратитесь к программе лабораторного контроля качества. В случае серьезных повреждений флакона и/или крышки, результатом чего стала утечка и/или загрязнение реагента, не используйте комплект и обратитесь к дистрибьютору.

Меры безопасности:
ВНИМАНИЕ: Данные реагенты содержат азид натрия, поэтому придерживайтесь всех необходимых мер безопасности при работе с ними в лаборатории.
Техническая информация безопасности материалов предоставляется по запросу.
Меры предосторожности:

  1. Не используйте просроченные реагенты, дата пригодности указанна на флаконе.
  2. Не замораживайте реагенты.
  3. Не используйте реагенты для других целей, кроме тех, которые указаны в разделе «ПРЕДНАЗНАЧЕНИЕ».
  4. Не меняйте крышки флаконов между собой, это может привести к загрязнению реагентов, что, впоследствии, приведет к неправильным результатам анализа.
  5. Следуйте требованиям по утилизации продукта.

ОБОРУДОВАНИЕ:

Описание по использованию оборудования предоставляется по запросу.

СОСТАВ РЕАГЕНТОВ:

Компоненты Ингредиенты Концентрация
Реагент 1 TRIS буфер pH 8.8
Лактат		 80 ммоль/л
107 ммоль/л
Реагент 2 NADH
Стабилизаторы		 0.2 ммоль/л

ПРИГОТОВЛЕНИЕ РЕАГЕНТА И ЕГО СТАБИЛЬНОСТЬ:

Перед использованием хорошо перемешайте каждый реагент. При правильном хранении набора, неоткрытые реагенты остаются стабильными до окончания даты пригодности, указанной на этикетке.

Монореагентная методика: добавьте 1 часть Реагента 2 к 2.5 частям Реагента 1. Рабочий Реагент стабилен 10 дней при температуре 2-8 °C.
Биреагентная методика: жидкие Реагенты 1 и 2 готовы для использования.

ИССЛЕДУЕМЫЙ МАТЕРИАЛ (ОБРАЗЕЦ):

Как образец используйте сыворотку, свободную от гемолиза. В работе с образцом рекомендуется придерживаться методики работы NCCLS (или похожих условий стандартизации). Образец необходимо набрать в соответствующий контейнер, предназначенный для этого образца. Сыворотка должна быть отделена от клеток сразу же после забора крови.
Стабильность: до 4 дней при температуре 2-8°C3

МЕТОД КОНТРОЛЯ:

Необходимые материалы (отсутствуют в данном наборе)

Описание Кат.№ Описание Кат.№
Калибратор AD983 Общее лабораторное оборудование Нет в наличии
Универсальный контроль
Уровень 1		 AD922 Фотометр Нет в наличии
Универсальный контроль
Уровень 2		 AD932 Соляной раствор Нет в наличии

Процедура проведения:
Длина волны: 340 нм
Температура: 30°C / 25°C / 37°C
Оптическая длина: 1 см

Монореагентная методика Бланк Калибратор Образец
Рабочий реагент 1000 μл 1000 μл 1000 μл
Образец ---- ---- 20 μл
Калибратор ---- 20 μл ----
Аккуратно смешайте и инкубируйте 1 мин. при 30°C (37°C).
В течение следующих 3 минут измеряйте среднее значение оптической плотности в минуту (∆OD/мин).

Факторный расчет:
340 нм U/l = ∆OD/мин x 8095
334 нм: U/l = ∆OD/мин x 8252
365 нм: U/l = ∆OD/мин x 15000

Биреагентная методика Бланк Калибратор Образец
Реагент 1 600 μл 600 μл 600 μл
Образец ---- ---- 20 μл
Калибратор ---- 20 μл ----
Аккуратно смешайте, инкубируйте 5 мин. при 37°C
Реагент 2 240 μл 240 μл 240 μл
Аккуратно смешайте, инкубируйте 1 мин. при 37°C
В течение следующих 4 минут измеряйте среднее значение оптической плотности в минуту (∆OD/мин).

Факторный расчет:
340 нм U/l = ∆OD/мин x 6800
334 нм: U/l = ∆OD/мин x 6931
365 нм: U/l = ∆OD/мин x 12600
*Вышеуказанные факторы должны указаны в инструкции калибратора (AD973).

Калибровка:
Используя рекомендуемый калибратор, откалибруйте прибор перед использованием:

  1. Используете новый комплект реагентов или меняете номер партии
  2. Производите профилактическое обслуживание или меняете неисправные детали фотометра.
  3. Контроли качества за пределами допустимой нормы.

Контроль качества:

Все клинические лаборатории должны установить программу внутреннего контроля качества. Проводить проверку аппаратуры и реагентов при помощи рекомендуемого или схожего контроля. Оценка, полученная для контроля качества, должна соответствовать допустимым пределам производителя или должна быть установлена в соответствии с программой лабораторного контроля качества.
Контроли должны подвергаться анализу:

  1. Когда получен предварительный отчет о результатах пациента.
  2. Когда производится профилактическое облуживание фотометра.
  3. В интервалах установленных программой лабораторного контроля качества.

РАСЧЕТЫ:

Монореагентная методика:
340 нм: U/l = ∆OD/мин x 8095 334 нм: U/l = ∆OD/мин x 8252 365 нм: U/l = ∆OD/мин x 15000

Биреагентная методика:
340 нм: U/l = ∆OD/мин x 6800 334 нм: U/l = ∆OD/мин x 6931 365 нм: U/l = ∆OD/мин x 12600

ГРАНИЦЫ НОРМЫ:
25°C 30°C 37°C


Сыворотка 		42-84 U/l 56-112 U/l 80-160 U/l
0.7 – 1.4 μkat/L 0.93 – 1.87 μkat/L 1.33 – 2.67 μkat/L