Биохимические реагенты » Ревматоидный фактор (РФ)

Ревматоидный фактор (РФ)

Audit Diagnostics – европейская надежность и качество химических реактивов для лабораторий различного профиля с 1993 года.

РЕВМАТОИДНЫЙ ФАКТОР (РФ)

УНИВЕРСАЛЬНЫЙ ЖИДКИЙ РЕАГЕНТ

ХАРАКТЕРИСТИКИ НАБОРА:

Кат. №.	Количество	Реагент	Хранение
AD528R	1 x 50 мл	РФ - 1	2-8°C
AD528R	1 x 10 мл	РФ - 2
AD538R	5 x 50 мл	РФ - 1
AD538R	5 x 10 мл	РФ - 2

ПРЕДНАЗНАЧЕНИЕ: In Vitro диагностике данный набор реагентов используется для количественного определения ревматоидного фактора (РФ) в сыворотке человека на автоматических и полуавтоматических анализаторах.

ТЕОРЕТИЧЕСКОЕ ОБОСНОВАНИЕ:

Основная серологическая особенность ревматоидного артрита - это повышенная концентрация аутоиммунных антител направленных против областей детерминанты в Fc-фрагменте человеческого и животного иммуноглобулина G, которые называются ревматоидными факторами (РФ) в крови и синовии. На сегодняшний день, потенциальная роль этих факторов в развитии болезней, а также внешние и генетические факторы, влияющие на появление РФ, уже хорошо изучены. Клиническое определение РФ широко применяют для диагностирования, прогнозирования и оценки эффективности лечения ревматоидного артрита. Также РФ можно обнаружить во всех классах иммуноглобулинов, чаще всего, определяемый в лаборатории РФ – это иммуноглобулин М; обнаруживается у 75-80% взрослых пациентов с ревматоидным артритом и у 10% детей с подростковым РА.

ПРИНЦИП МЕТОДА:

Метод основан на иммунологической реакции определения РФ иммуноглобулина М, которую выполняют с помощью латекс-агглютенации (частицы латекса нагружены иммуноглобулином G человека). Значение РФ определяются турбидиметрически при длине волны 500-600 нм, с использованием постоянного измерения поправки образца

Антиген в образце + антитело к РФ → комплекс антиген/антитело

МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ: Реагенты можно использовать только профессионально для лабораторной диагностики. Внимательно прочитайте инструкцию по работе с реагентами. Отклонения от порядка выполнения процедуры могут изменить порядок выполнения анализа.
Компоненты цвета и вида:
Реагент 1: Прозрачная бесцветная жидкость.
Реагент 2: Белая мутная жидкость.

Любые незначительные изменения цвета могут означать, что анализ, возможно, выполнен некорректно. В этом случае обратитесь к программе лабораторного контроля качества. В случае серьезных повреждений флакона и/или крышки, результатом чего стала утечка и/или загрязнение реагента, не используйте комплект и обратитесь к дистрибьютору.

Меры безопасности:
Внимание: придерживайтесь всех необходимых мер безопасности при работе с реагетами в лаборатории – реагент содержит азид натрия.
Техническая информация безопасности материалов предоставляется по запросу.

Меры предосторожности при использовании:

Не используйте просроченные реагенты, дата пригодности указанна на флаконе.
Не замораживайте реагенты.
Не используйте реагенты для других целей, кроме тех, которые указаны в разделе «ПРЕДНАЗНАЧЕНИЕ».
Не меняйте крышки флаконов между собой, это может привести к загрязнению реагентов, что, впоследствии, приведет к неправильным результатам анализа.
Следуйте требованиям по утилизации продукта.

ОБОРУДОВАНИЕ:

Описание по использованию оборудования предоставляется по запросу.

СОСТАВ НАБОРА:

Компонент	Ингредиенты	Концентрация
Реагент 1	Фосфатный буфер	0.05 M
	NaCl	0.15 M
	Стабилизаторы/ антикоагулянты	----
Реагент 2	латексные частицы, нагруженные IgG человека	----

ПРИГОТОВЛЕНИЕ РЕАГЕНТОВ И ИХ СТАБИЛЬНОСТЬ:

Реагент 1 и 2 готовы для использования.
Перед использованием аккуратно перемешайте каждый флакон с реагентом.
При правильном хранении набора, неоткрытые реагенты остаются стабильными до окончания даты пригодности, указанной на этикетке. Открытые компоненты стабильны в течение 1 месяца при 2-8°C.

Приготовьте 6 стандартов, последовательно разведенных калибратором (AD9603) в соляном растворе в следующих пропорциях.

Разведение	Неразбавленный	1/2	1/4	1/8	1/16	1/32
Фактор	1	0.5	0.25	0.125	0.063	0.032

ИССЛЕДУЕМЫЙ МАТЕРИАЛ (ОБРАЗЕЦ):

Как образец используйте сыворотку, свободную от гемолиза. В работе с образцом рекомендуется придерживаться методики работы NCCLS (или похожих условий стандартизации). Образец необходимо набрать в соответствующий контейнер, предназначенный для этого образца. Сыворотка должна быть отделена от клеток в течение 2 часов после забора.
Сыворотку/плазму необходимо отделить от клеток крови в течение 2 часов после забора. Стабильность: до 72 часов при температуре 2-8°C3.

МЕТОД КОНТРОЛЯ:

Необходимое оборудование (отсутствует в данном комплекте):

Описание	Кат. №	Описание	Кат. №
Калибратор	AD9603	Фотометр	Нет
РФ контроли Уровень 1	AD9004	Общее лабораторное оборудование	Нет
РФ контроли Уровень 2	AD9014	Соляной раствор 0.9 г/л	Нет

Процедура определения:
Длина волны: λ 500-600 нм
Температура: 37°C
Оптический путь: 1 см

	Бланк	Калибратор	Образец
Реагент 1	1 мл	1 мл	1 мл
Реагент 2	200 µл	200 µл	200 µл
Образец	----	----	10 µл
Калибратор	----	10 µл	----
Шаг 1: перемешайте Р1 и Р2, добавьте образец (или калибратор) и сразу после смешивания измеряйте оптическую плотность (OD1), после этого инкубируйте при 37°C; Шаг 2: измеряйте оптическую плотность (OD2) через 5 мин.

Калибровка:
Используя рекомендуемый калибратор, откалибруйте прибор перед использованием:

Используете новый набор или меняете номер партии реагентов.
Производите профилактическое обслуживание или меняете неисправные детали фотометра.
Контроли качества за пределами допустимой нормы.

Контроль качества:
Все клинические лаборатории должны установить программу внутреннего контроля качества. Проводить проверку аппаратуры и реагентов при помощи рекомендуемого или схожего контроля. Оценка, полученная для контроля качества, должна соответствовать допустимым пределам производителя или должна быть установлена в соответствии с программой лабораторного контроля качества.
Контроли должны подвергаться анализу:

Когда получен предварительный отчет о результатах пациента.
Когда производится профилактическое облуживание фотометра.
В интервалах установленных программой лабораторного контроля качества.

РАСЧЕТЫ:

РФ образца = Absобразца – Absбланка/Absкалибратора – Absбланка x Концентрацию калибратора

(Коэффициент пересчета: KU/л = 1 x U/мл).

ГРАНИЦЫ НОРМЫ:

	U/мл	kU/л
Нормальный уровень	< 20	< 20

Каждая лаборатория должна установить свою собственную нормированную область значений. Полученные результаты всегда необходимо сравнивать с результатами анализов пациента и его историей болезни. МЕТРОЛОГИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ: Рабочие характеристики могут меняться в зависимости от используемой аппаратуры. Полученные данные в разных лабораториях могут отличаться от результатов, полученных в своей лаборатории.

Линейность:
Линейность параллельна уровню калибровки.
Для образцов с большей концентрацией, разведите: 1:4 с 0.9% NaCl (9г/л) и еще раз подвергните анализу. Результат увеличить в 5 раз.

Прозона:
Система не показывает отклонения прозоны как минимум до1500 U/мл (1500 kU/l).

Интерференция:

Желтуха: нарушение менее 10% при показателях билирубина (и фракций) до 560 µмоль/л.
Липемия: нарушение менее 5% при показателях триглицеридов до 5 г/л.

Чувствительность: самый низкий уровень обнаружения < 4.0 U/мл.

Точность:

Внутрисерийная N = 10	Среднее значение (U/мл)	%CV	Межсерийная N = 10	Среднее значение (U/мл)	% CV
Уровень 1	30	2.4	Уровень 1	30	2.7
Уровень 2	80	2.8	Уровень 2	80	1.8

Погрешность:

Известные концентрации ревматоидного фактора были добавлены на основе разбавителя в сыворотку, свободную от РФ. Каждый образец был исследован трижды. Воспроизводимость метода ± 10% или в пределах 2 IU/мл.

Метод сравнения:
Сравнение 29 образцов с использованием этих реагентов РФ (y) и другими доступными реагентами (x), дают следующие результаты.

y = 1.118x -2.0965

r = 0.9714

Ранг образца: от 0 до 1000 U/мл